制备
HCG抗体常用的技术主要包括单克隆抗体制备技术和多克隆抗体制备技术，其中单克隆抗体制备技术更为常用且关键，其特点可从以下方面阐述：
一、单克隆抗体制备技术的特点
1.特异性强：单克隆抗体仅识别HCG的单一表位，尤其是β-HCG，与LH等类似激素的交叉反应极低，优质单克隆抗体对β-HCG的特异性可超过99%，与LH的交叉反应率低于0.1%，有效避免妊娠检测中的假阳性问题。
2.均一性高：单克隆抗体由单一B细胞克隆产生，批次间差异小，确保实验结果的重复性和稳定性。
3.亲和力强：单克隆抗体与HCG的结合力强，结合常数（KD）通常在10⁻⁹至10⁻¹¹mol/L范围内，适用于低浓度HCG的检测。
4.制备周期可控：虽然单克隆抗体制备周期较长（约2-3个月），但通过标准化流程可确保抗体质量的稳定性。
二、单克隆抗体制备流程的关键特点
1.免疫原选择：以重组β-HCG或HCG全长为免疫原，通过CHO细胞表达确保正确折叠和糖基化修饰，使免疫原与天然HCG结构一致，减少交叉反应。
2.动物免疫：将重组β-HCG与佐剂混合后，通过腹腔注射免疫Balb/c小鼠（初次免疫+3次加强免疫），通过ELISA监测血清抗体效价，当效价超过1:10⁵时进行细胞融合。
3.细胞融合与筛选：取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞（如SP2/0）融合，使用HAT培养基筛选杂交瘤细胞。通过ELISA筛选能结合HCG的阳性克隆，并排除与LH、FSH等激素发生交叉反应的非特异性克隆。
4.克隆化与稳定性验证：采用有限稀释法进行2-3轮克隆化培养，获得稳定分泌特异性抗体的单克隆细胞株。通过长期传代培养验证细胞株的稳定性。
三、HCG抗体生产与纯化的特点
1.体外培养规模化：杂交瘤细胞在无血清培养基中大规模培养，上清液经Protein A亲和层析纯化，纯度超过95%。
2.体内制备辅助：通过小鼠腹腔注射杂交瘤细胞制备腹水，经纯化后获得高纯度抗体。
3.质量验证严格：最终抗体通过SDS-PAGE验证纯度，ELISA验证活性，确保符合临床和科研需求。
四、HCG抗体性能指标的特点
1.灵敏度高：标记后检测下限可达0.1 mIU/mL，适用于早孕检测（此时HCG水平较低）。
2.稳定性强：抗体在-20℃条件下储存可稳定2年以上，4℃短期保存（1个月）活性无明显下降。
更新时间：2025-09-24
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抗原抗体
